Bakteriyaların böyüməsini ölçməyin bir çox yolu var və bir üsul digərindən daha mürəkkəbdir. Bəzən ölçmə ardıcıllığını göz ardı etmək lazım olsa da, ən asan yol bakteriyaların böyüməsini dəqiq ölçməkdir, buna görə də tez -tez istifadə olunur. Ən çox istifadə edilən üsullar bakteriyaların izlənməsi və sayılması, quru və ya yaş kütlənin ölçülməsi və bulanıqlıq/bulanıqlıq səviyyələrinin ölçülməsidir. Məktəbinizin laboratoriyasında bu təcrübələrdən ən az birini yerinə yetirmək üçün lazım olan alətlər və avadanlıqlar olmalıdır.
Addım
Metod 1 /3: Canlı Bakteriyaların İzlənməsi
Addım 1. Tərkibi hazırlayın
Hazırlanması lazım olan bir çox xüsusi alət var və bir biologiya laboratoriyasında olmaya bilər. Təcrübəyə başlamazdan əvvəl bütün avadanlıqları və qabları hazırlayın ki, proses zamanı heç bir problem olmasın. Dərhal istifadə olunan hər bir maddəni və bu təcrübənin əsas şərtlərini bilməlisiniz.
- Hesablama otağını hazırlayın. Daxili bir kameraya, mikroskop şüşəsinə və mikroskopa malikdir, buna görə qurmaq və istifadə etmək asandır. Bir laboratoriya və ya məktəb ləvazimatı mağazasından satın ala bilərsiniz. Bu vasitədə bütün prosesi sizə istiqamətləndirən təlimatlar olmalıdır.
- Bir tökmə fincan və ya yayılmış fincan hazırlayın. Bu qabların hər ikisi içəridəki bakteriyaları izləməyə imkan verir.
- Mədəniyyət, bir təcrübədə orqanizmlərin böyüməsini təsvir etmək üçün istifadə olunan bir termindir.
- Bulyon, mədəniyyətin böyüdüyü bir maye mühitdir.
Addım 2. Tökmə lövhəsi və ya yayılmış boşqab üsulundan istifadə edin
Mikroskop istifadə etmək üçün bakteriyaları birbaşa qaba yerləşdirə bilərsiniz. Kültürü bir boşqaba tökün və mikroskopun altına qoyun. Mövcud bakteriya hüceyrələrinin sayını izləyin.
Addım 3. Konsentrasiya dozasının doğru olduğundan əmin olun
Çox olarsa, bakteriyalar bir -birinə yığılacaq və səhv hesablaya bilərsiniz. Daha çox bulyona qarışdıraraq mədəniyyəti seyreltin. Çox az olarsa, hesablamanın nəticələri dəqiq olmayacaq. Filtrləmə sistemindən istifadə edərək suyu süzün.
Addım 4. Bakteriyaların sayılması
Son addım bakteriyaları bir -bir saymaqdır. Sayma kamerasındakı böyüdücü lensə baxın və gördüyünüz bakteriya sayını yazın. Nəticələri digər testlərin nəticələri ilə müqayisə edin.
Metod 2 /3: Quru və yaş kütlənin ölçülməsi
Addım 1. Doğru avadanlıqların olduğundan əmin olun
Bu üsul bahalı avadanlıqlardan və çox vaxtdan istifadə edir. Laboratoriyanızda lazım olan avadanlıq yoxdursa, başqa bir metoddan istifadə etmək yaxşı olar. Ancaq laboratoriyanız kifayət qədər yaxşı təchiz olunmuşsa, daha ardıcıl nəticələr verdiyindən bu üsulu tövsiyə edirik. Bu üsulda sizə lazım olacaq:
- Hidravlik çəkisi olan konveksiya sobası
- Alüminiumdan hazırlanmış çəki qabı
- Bir flakon dəsti (laboratoriya şüşələri)
- Santrifüj maşın (santrifüj) və ya laboratoriya filtrasiya sistemi
Addım 2. Kültürün balonda olduğundan əmin olun
Balqabağa mədəniyyət əlavə edin. Bu mərhələdə mədəniyyət bir bulyon olmalıdır, baxmayaraq ki, sonradan yenidən ayrılacaq.
Addım 3. Alüminium çəki qabını laboratoriya sobasında qurutun
Bunun əvəzinə, diametri 47 mm və gözenek ölçüsü 0,45µm olan bir selüloz asetat filtr membranından istifadə edə bilərsiniz. İstifadə etdiyiniz çəki konteynerindən asılı olmayaraq, bakterial hüceyrələri çəkərkən daha sonra çıxılması lazım olduğu üçün çəkin.
Addım 4. Kültürü bərabər qarışdırılana qədər qabda qarışdırın
Hüceyrə cazibə qüvvəsi səbəbiylə təbii olaraq batacaq və balona bərabər yayılması üçün qarışdırılması lazımdır. Bu şəkildə daha çox nümunə əldə edə bilərsiniz.
Addım 5. Bakteriya hüceyrələrini bulyondan ayırmaq üçün bir santrifüjdən istifadə edin
Bu alət qabı döndərir və sürətlə tarazlaşdırır ki, suyu boşaltsın və mədəni kolbada buraxsın.
Addım 6. Balqabağın üzərindəki pastanı cızın və çəki qabına qoyun
Bulyonu atın, çünki artıq ehtiyacınız yoxdur. Ancaq balqabaqdan hələ də qurtulmayın, çünki hələ də istifadə olunacaq.
Addım 7. Mərkəzdənqaçma maşını yuyun və durulama suyunu qaba tökün
Yaş çəkini əldə etmək üçün durulama suyunu bakteriya hüceyrələrinə tökün.
Addım 8. Quru çəkini tapın
Quru çəkini ölçmək üçün qabı sobaya qoyun və istifadə olunan sobadan və/və ya çəki qabından gələn təlimatlara uyğun olaraq 6-24 saat ərzində 100ºC-də qurudun. Bakteriyaların yanmaması üçün temperaturun çox yüksək olmadığından əmin olun. Bitirdikdən sonra bakteriyaları çəkin və nəticəni çəki qabının çəkisi ilə azaltmağı unutmayın.
Metod 3 /3: Bulanıqlığın ölçülməsi
Addım 1. Lazımi avadanlıqları hazırlayın
Bir işıq mənbəyinə və bir spektrofotometrə ehtiyacınız olacaq. Hər ikisini laboratoriya təchizat mağazalarında əldə etmək olar. Spektrofotometrdə, alətin sahib olduğunuz modelə uyğun olaraq istifadə edilməsində sizə kömək edəcək təlimatlar olmalıdır. Spektrofotometrin qiyməti olduqca əlverişlidir və istifadəsi asandır, belə ki, bakteriyaların böyüməsini ölçmək üçün ən çox istifadə olunan üsullardan biri ola bilər.
Addım 2. Nümunəni yandırın
Laymanın dediyinə görə, bulanıqlıq nümunənin bulanıqlıq səviyyəsidir. NTU (Nefelometrik Bulanıklık Birimi) ilə ölçülən bulanıqlıq ölçmə nömrəsini almalısınız. Nümunəni dəqiq ölçmədən əvvəl bu alətin kalibrlənməsi lazımdır.
Addım 3. Nəticələri qeyd edin
Bulanıklıq, nümunədəki bakteriya sayından təsirlənir. Spektrofotometr də ötürülmə faizini (%T) sizə xəbər verəcəkdir. Bulanıklıq azalsa bu rəqəm artacaq. Bakteriyaların böyüməsini ölçmək üçün nəticələri digər testlərin nəticələri ilə müqayisə edin.
Xəbərdarlıq
- Bir bakteriya koloniyası ilə məşğul olduğunuz üçün təhlükəsizlik gözlükləri və əlcəklər kimi təhlükəsizlik vasitələri geyinərək tədbir alın. Xüsusilə öyrənilən bakteriyaların növünü bilmirsinizsə, maska taxmaq da yaxşı bir fikirdir.
- Hər hansı bir bakteriya növü ilə, hətta zərərsiz növlərlə də işlətmədən əvvəl tədbir alın. Başlamadan əvvəl bədəninizdəki bütün açıq yaraların tamamilə örtülü olduğundan əmin olun.
